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設(shè)計實驗體驗酶作用的專一性

發(fā)布時間:2012-09-20

設(shè)計實驗體驗酶作用的專一性

??? 酶作用的專一性是酶與一般化學(xué)催化劑的主要區(qū)別之一,所謂酶作用的專一性,即酶只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng),而對其它物質(zhì)則不能發(fā)揮催化作用。正是因為酶作用的專一性,才使得生物體內(nèi)復(fù)雜多樣的細(xì)胞代謝能夠有條不紊的進(jìn)行。本實驗以蔗糖酶(來源于酵母)及淀粉酶對淀粉和蔗糖的作用為例,來探究酶作用的專一性。

??? 淀粉和蔗糖無還原性,但在淀粉酶的作用下,淀粉很容易水解成為麥芽糖、葡萄糖(均具有還原性)。在同樣的條件下,淀粉酶不能催化蔗糖的水解,蔗糖酶能催化水解蔗糖生成具有還原性的葡萄糖和果糖,但不能催化淀粉水解.

本實驗采用本尼迪克特(Benedict)試劑檢測還原糖。它與還原性糖反應(yīng)的結(jié)果是與斐林試劑一致的,只是比斐林試劑更穩(wěn)定。

目的要求:

嘗試設(shè)計實驗驗證酶作用的專一性,并體驗設(shè)計實驗的一般原則(單因子變量原則和對照試驗原則)。

材料用具:

1. 試劑:2% 蔗糖溶液,1%可溶性淀粉淀液(稱取可溶性淀粉1,加水10 mL攪成糊狀,傾入90 mL預(yù)先煮沸的蒸餾水中,攪拌均勻,再煮沸23分鐘,冷卻后定容至100 mL此溶液需新鮮配制),枯草桿菌α―淀粉酶的稀釋液,蔗糖酶液(取適量干酵母100 ,置于研缽內(nèi),加少量細(xì)砂及50 mL蒸餾水,用力研磨提取約l小時,再加蒸餾水使總體積為500 mL左右,過濾。濾液保存于冰箱內(nèi)備用。)本尼迪克特(Benedict)試劑,簡稱本氏試劑(將17.3硫酸銅溶于約50mL蒸餾水中,另將173 檸檬酸鈉及100碳酸鈉加于約800mL蒸餾水中,加熱,攪拌使之溶解,冷卻后將上述碳酸銅溶液緩緩傾入檸檬酸一碳酸鈉溶液中,混勻,并稀釋到100mL。此試劑可長期保存。)

2. 用具:大小、材質(zhì)相同的試管若干,試管架,滴管,小量筒,恒溫水浴鍋,大、小燒杯,酒精燈,三腳架,石棉網(wǎng),火柴、蒸餾水

方法步驟:

??? 1. 2支試管,分別編號12,然后各加入本氏試劑2 mL,分別加入l %可溶性淀粉溶液和2 %蔗糖溶液各4滴,混合均勻后,放在沸水浴中煮23分鐘,觀察有無磚紅色沉淀發(fā)生。

2. α―淀粉酶的專一性試驗:

1)取3 支相同的試管,分別編號1、23,分別加入等量的(3 mL1 %可溶性淀粉、2 %蔗糖溶液及蒸餾水。

2)再向3支試管各添加α―淀粉酶稀釋液lmL,混合均勻。

3)放入37 恒溫水浴中保溫15分鐘后取出。

4)向3支試管中各加本氏試劑2 mL,混合均勻,將試管放在沸水浴中煮23分鐘。

5)觀察每支試管中出現(xiàn)的顏色變化并記錄。

3. 蔗糖酶的專一性試驗:

1)取3 支相同的試管,分別編號1、2、3,分別加入等量的(3 mL1 %可溶性淀粉、2 %蔗糖溶液及蒸餾水

2)向3支試管各添加蔗糖酶液l mL,混合均勻。

3)放入37 恒溫水浴中保溫10分鐘后取出。

4)向3支試管中各加本氏試劑2 mL,混合均勻,將試管放在沸水浴中煮23分鐘。

5)觀察每支試管中出現(xiàn)的顏色變化并記錄。

討論:

1. 步驟1中,兩支試管中分別出現(xiàn)什么現(xiàn)象?這一現(xiàn)象說明了什么?

2. 步驟23中,3號試管加蒸餾水的目的是什么?三支支試管中分別出現(xiàn)什么現(xiàn)象?分析這些現(xiàn)象,說明了什么?

3. 上述實驗步驟中如何控制變量,排除其他因素對實驗結(jié)果的干擾?

結(jié)論:

通過對實驗結(jié)果的分析和討論,你對酶的作用形成了哪些認(rèn)識?請將結(jié)論寫下來。

本實驗的結(jié)論:???????????????????????????????????????????????????

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