1855年,耐格?(K.W.Mageli)發(fā)現(xiàn)?素透?已損傷和未損傷的植物細(xì)胞的情況并不相同。他便通過(guò)細(xì)胞的滲透特性去研究它的“邊界”(他?次把細(xì)胞“邊界”稱為“質(zhì)膜”)。耐格?和克拉默(Cramer)?起進(jìn)?實(shí)驗(yàn),通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞具有敏感的滲透特性,它的體積可以隨著周圍介質(zhì)的不同滲透強(qiáng)度?改變。當(dāng)細(xì)胞外?的溶質(zhì)滲透強(qiáng)度?時(shí),細(xì)胞就變?;溶質(zhì)滲透強(qiáng)度?時(shí),細(xì)胞就變?。耐格?提出,細(xì)胞與環(huán)境之間正是通過(guò)這種“邊界”發(fā)?關(guān)系的。耐格?在試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)這樣的情況:把麗藻屬(Nitella)長(zhǎng)導(dǎo)管細(xì)胞的?端放??溶液內(nèi),另?端放進(jìn)糖溶液,細(xì)胞內(nèi)含物發(fā)?了傳動(dòng)障礙。在?中?端的細(xì)胞汁液流向糖溶液中的?端,并帶著所有可移動(dòng)的粒?。可是,原先已知的事實(shí)表明,蒸騰作?和滲透壓加在?起也不?以將液體壓到植物的上部,這兩種??法解釋植物汁液流動(dòng)的?向。因?耐格?認(rèn)為,不得不假設(shè)有?股其他的?量,它們?cè)诳v壁,更可能在橫壁上。這種?量加?了細(xì)胞溶液從下往上的流向。1897年,Crijins和赫定(Hedin)?紅細(xì)胞做實(shí)驗(yàn),同樣也證明分?的通透性與其在脂質(zhì)中的溶解度有關(guān),且溶解度越?越容易通過(guò).此外,德國(guó)植物?理學(xué)家普費(fèi)弗(W.Pfeffer)對(duì)植物細(xì)胞的滲透?為進(jìn)?了?量的試驗(yàn),并于1897年提出了兩個(gè)重要的結(jié)論:第?,細(xì)胞是被質(zhì)膜包被著的;第?,這層質(zhì)膜是?和溶質(zhì)通過(guò)的普遍障礙。同時(shí),很快?發(fā)現(xiàn),細(xì)胞膜這個(gè)屏障具有明顯的選擇性,?些物質(zhì)可通過(guò)它,?另?些物質(zhì)?乎完全不能通過(guò)。1899年,英國(guó)細(xì)胞?理學(xué)家?jiàn)W弗頓(C.Overton)發(fā)表?系列關(guān)于化合物進(jìn)?細(xì)胞的觀察結(jié)果,他發(fā)現(xiàn)分?的極性越?,進(jìn)?細(xì)胞的速度越?,當(dāng)增加?極性基團(tuán)(如烷基鏈)時(shí),化合物進(jìn)?的速度便增加。奧弗頓的結(jié)論是,控制物質(zhì)進(jìn)?細(xì)胞的速度的細(xì)胞膜是脂肪性物質(zhì),其中含有固醇和其他脂類。因此,當(dāng)時(shí)確?了有?層脂質(zhì)的膜圍繞著細(xì)胞的認(rèn)識(shí)。1917年,朗姆?(Langmuir)將磷脂溶于苯和?中,當(dāng)苯揮發(fā)完以后,磷脂分?分布散亂,經(jīng)過(guò)推擠,磷脂分?排列成了單層,?且每個(gè)分?的?端浸??中,另?端浮于??。成功將?層磷脂分?鋪在了??上!?1925年,?特(E.Gorter)和格倫德?tīng)?F.Grendel)?丙酮(?種有機(jī)溶劑,可以溶解脂質(zhì))提取了?類紅細(xì)胞質(zhì)膜的脂類成分,將其鋪展在??,測(cè)出膜脂展開(kāi)的?積?倍于細(xì)胞表?積,因?推測(cè)細(xì)胞膜由雙層脂分?組成。成?前提:a.紅細(xì)胞的全部脂質(zhì)都在膜上;b.丙酮法抽提完全;c.RBC平均表?積估算正確。(70%~80%偏低);40年后Bar重復(fù)這?試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞膜平鋪?積應(yīng)不是70%~80%,?是1.5倍還有蛋?質(zhì)表?,同時(shí)?膜?積是99μm2,濕膜?積則為145μm2。兩項(xiàng)誤差相抵,結(jié)果基本正確。根據(jù)細(xì)胞的?理?化特征,曾先后推測(cè)質(zhì)膜是?種脂肪柵、脂類雙分?層和由蛋?質(zhì)-磷脂-蛋?質(zhì)構(gòu)成的三夾板結(jié)構(gòu)。20世紀(jì)初,科學(xué)家將細(xì)胞膜從哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞中分離出來(lái),發(fā)現(xiàn)細(xì)胞膜不但會(huì)被溶解脂質(zhì)的物質(zhì)溶解,也會(huì)被蛋?酶分解。1935年英國(guó)丹尼利(J.Danielli)和戴維森(H.Davson)發(fā)現(xiàn)質(zhì)膜的表?張??油-?界?的張?低得多,推測(cè)膜中含有蛋?質(zhì),從?提出了”蛋?質(zhì)-脂類-蛋?質(zhì)”的三明治模型。認(rèn)為質(zhì)膜由雙層脂類分?及其內(nèi)外表?附著的蛋?質(zhì)構(gòu)成的。1959年在上述基礎(chǔ)上提出了修正模型,認(rèn)為膜上還具有貫穿脂雙層的蛋?質(zhì)通道,供親?物質(zhì)通過(guò)。1959年羅伯特森(J.D.Robertson)?鋨酸處理了細(xì)胞膜(蛋?質(zhì)經(jīng)鋨酸作?后形成?電?密度的鋨?,在電鏡下呈??),?超薄切?技術(shù)獲得了清晰的紅細(xì)胞細(xì)胞膜照?,顯?暗-明-暗三層結(jié)構(gòu),厚約7.5nm。這就是所謂的“單位膜”模型。它由厚約3.5nm的雙層脂分?和內(nèi)外表?各厚約2nm的蛋?質(zhì)構(gòu)成。單位膜模型的不?之處在于把膜的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)描寫成靜?的不變的。20世紀(jì)五六?年代冰凍電鏡技術(shù)應(yīng)?于細(xì)胞膜的研究,它使?們能在三維空間更好地了解細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu),從?認(rèn)識(shí)到羅伯特森“單位膜”模型中脂質(zhì)雙層中含有蛋?質(zhì)顆粒。冰凍蝕刻(freeze-etching)亦稱冰凍斷裂(freeze-fracture)。標(biāo)本置于-100?C的?冰或-196?C的液氮中,進(jìn)?冰凍。然后?冷?驟然將標(biāo)本斷開(kāi),升溫后,冰在真空條件下迅即升華,暴露出斷?結(jié)構(gòu),稱為蝕刻(etching)。蝕刻后,向斷?以45度?噴涂?層蒸汽鉑,再以90度?噴涂?層碳,加強(qiáng)反差和強(qiáng)度。然后?次氯酸鈉溶液消化樣品,把碳和鉑的膜剝下來(lái),此膜即為復(fù)膜(replica)。復(fù)膜顯?出了標(biāo)本蝕刻?的形態(tài),在電鏡下得到的影像即代表標(biāo)本中細(xì)胞斷裂?處的結(jié)構(gòu)。1970年弗雷(L.D.Frye)和埃迪登(H.Edidin)他們?發(fā)綠?熒光的染料標(biāo)記??細(xì)胞表?的蛋?質(zhì)分?,?紅?熒光的染料標(biāo)記?細(xì)胞表?的蛋?質(zhì)分?,?滅?的仙臺(tái)病毒促使兩種細(xì)胞融合。剛剛?cè)诤系募?xì)胞?個(gè)半球帶有紅?熒光,另?個(gè)半球帶有綠?熒光。如果把該細(xì)胞放在37 ℃條件下培養(yǎng)40 min,加上不同的濾光?觀察顯?紅、綠熒光在細(xì)胞表?混合均勻,把該細(xì)胞放在l ℃條件下培養(yǎng)40 min,加上不同的濾光?觀察顯?,細(xì)胞保持開(kāi)始狀態(tài),即紅、綠熒光沒(méi)有混合。本實(shí)驗(yàn)證明了構(gòu)成細(xì)胞膜的磷質(zhì)和蛋?質(zhì)分??多數(shù)不是靜?的,?是可以運(yùn)動(dòng)的,即細(xì)胞膜具有?定的流動(dòng)性。1972美國(guó)加州?學(xué)的?格(S.J.Singer)和尼克森(G.L.Nicolson)根據(jù)免疫熒光技術(shù)、冰凍蝕刻技術(shù)的研究結(jié)果,在“單位膜”模型的基礎(chǔ)上提出“流動(dòng)鑲嵌模型”。該模型認(rèn)為:細(xì)胞膜由流動(dòng)的雙脂層和嵌在其中的蛋?質(zhì)組成。磷脂分?以疏?性尾部相對(duì),極性頭部朝向?相組成?物膜?架;蛋?質(zhì)或嵌在雙脂層表?,或嵌在其內(nèi)部,或橫跨整個(gè)雙脂層,表現(xiàn)出分布的不對(duì)稱性。該模型的不?之處:忽視了蛋?質(zhì)分?對(duì)脂類分?流動(dòng)性的限制作?;忽視了膜各部分流動(dòng)性的不均勻性等, 從?使?們?提出了?些新的模型。1975年,?拉赫(Wallach)提出“晶格模型”?!熬Ц衲P汀笔菍?duì)流動(dòng)鑲嵌模型的補(bǔ)充,強(qiáng)調(diào)流動(dòng)的整體性。?膜脂可逆地進(jìn)??序(液態(tài))和有序(晶態(tài))的相變來(lái)解釋?物膜的流動(dòng)性。膜鑲嵌蛋?對(duì)脂類分?的運(yùn)動(dòng)具控制作?。鑲嵌蛋?和它周圍的脂類分?形成晶格狀態(tài),這些不移動(dòng)的脂類分?稱界?脂質(zhì),?流動(dòng)的脂質(zhì)呈??、點(diǎn)狀分布。所以脂質(zhì)的流動(dòng)是局部的,并?整個(gè)脂雙層都在流動(dòng)。1977年,賈因(Jain)和懷特(White)提出?物膜是由具有不同流動(dòng)性的板塊鑲嵌?成的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)。該模型強(qiáng)調(diào)整個(gè)?物膜是由不同組織結(jié)構(gòu)、不同??、不同性質(zhì)、不同流動(dòng)性的可移動(dòng)的膜塊所組成,這些彼此獨(dú)?移動(dòng)的脂質(zhì)區(qū)(有序的“板塊”)之間被流動(dòng)的脂質(zhì)“板塊”(?序的)所分割, 兩種“板塊”之間可能存在?種連續(xù)的動(dòng)態(tài)平衡,因?細(xì)胞膜實(shí)際上是同時(shí)存在有不同流動(dòng)性的板塊鑲嵌?成的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu);這種結(jié)構(gòu)使細(xì)胞膜的各部分的流動(dòng)性處于不均?狀態(tài), 并可隨?理狀態(tài)和環(huán)境條件的變化?發(fā)?晶態(tài)和?晶態(tài)的相變化。這種板塊鑲嵌模型有利于說(shuō)明膜功能的多樣性及調(diào)節(jié)機(jī)制的復(fù)雜性。1997年,西蒙斯(K.Simons)和伊琳娜.易科寧(Elina Ikonen)等?提出提出了“功能筏(Functional rafts)”的概念,現(xiàn)在?般稱為“脂筏(lipid raft)。“脂筏模型”可以說(shuō)是細(xì)胞膜功能最新的功能解釋模型。脂筏是在?物膜上富含膽固醇和?油脂的微結(jié)構(gòu)域(microdomain),該結(jié)構(gòu)域約70nm左右,是?種動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu),位于以?油磷脂為主體的?物膜中;由于?油脂具有較長(zhǎng)的飽和脂肪酸鏈,分?間的作??較強(qiáng),所以這些區(qū)域結(jié)構(gòu)致密,介于?序液體與液晶之間,稱為有序液體。脂筏載著執(zhí)?某些特定?物學(xué)功能的各種膜蛋?他們就像?個(gè)蛋?質(zhì)停泊的平臺(tái),與膜的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋?質(zhì)分選、跨膜物質(zhì)運(yùn)輸?shù)染忻芮械年P(guān)系。脂筏最初可能在內(nèi)質(zhì)?上形成,轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜上后,有些脂筏可在不同程度上與膜下細(xì)胞?架蛋?交聯(lián).推測(cè)?個(gè)100nm??的脂筏可能載有600個(gè)蛋?分?。
從細(xì)胞膜的探索歷程中我們明確的認(rèn)識(shí)到:科學(xué)家研究細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的歷程是從物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)默F(xiàn)象開(kāi)始的。分析成分是了解結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ),現(xiàn)象和功能?提供了探究結(jié)構(gòu)的線索。進(jìn)??們?cè)趯?shí)驗(yàn)觀察的基礎(chǔ)上提出假說(shuō),?通過(guò)進(jìn)?步的實(shí)驗(yàn)來(lái)修正假說(shuō)。最終達(dá)到認(rèn)知事物的本質(zhì),了解表象下?隱藏的真理。